Genovis 抗體亞單位切割酶

在體內外細胞或組織實驗中，全抗體中由于Fc保守片段的存在可能導致許多意想不到的結果，因此單一的特異性片段F(ab’)2或 Fab 將可能獲得理想的實驗結果。常規獲取單一F(ab’)2 或 Fab片段的方法為木瓜蛋白酶或胃蛋白酶，但是這些方法需要嚴苛的降解條件或催化劑的存在，因此不僅耗時，而且產量降低，產物活性被部分破壞。

FabRICATOR ^?是目前*一種能在Ig G內特定的單一位點進行切割的蛋白酶，切割后產生F(ab’)2 及 Fc片段。FabRICATOR ^?是由人化膿性鏈球菌的IdeS酶重組改進而來，IdeS酶對Ig G有特異性，目前還未發現該酶有其他底物存在。改進后的FabRICATOR ^?屬于半胱氨酸蛋白酶，能快速準確切割Ig G生成F(ab’)2 及 Fc片段。這種切割反應可在生理條件下進行（在目前通用的緩沖體系pH 從6.0 到8.0均可勝任），因此zui大程度上保持了抗體活性。 目前所有人類的IgG均被證實可被FabRICATOR?特異性切割，另外兔、綿羊及猴子的IgG也適用但是小鼠只有IgG3可被高效切割，而小鼠IgG2則需要提高FabRICATOR?濃度及延長切割時間

FabRICATOR ^?相比傳統抗體亞單位制備法的優勢：

·         快速切割省時省力30 minutes

·         無需嚴苛的反應條件

·         產物單一明確（Fc 及(Fab')2片段）

·         生理條件下反應確保產物活性

FabRICATOR ?相關產品

一、   FabRICATOR (IdeS)：

快速在IgG 特意位點切割，得到 Fc 及(Fab')2片段。

二、FabULOUS (SpeB)

作為FabRICATOR家族的補充，FabULOUS可以在抗體較高位點進行切割，便于進一步分析抗體結構。

三、IgGZERO (Endo S) 與GlycINATOR (EndoS2)

特異性水解去除抗體Fc片段上的N型糖鏈，增強抗體特異性與敏感性。

四、FragIT 試劑盒

    該試劑盒含有將FabRICATOR融合與瓊脂糖微珠上，配備純化柱便于高效快速地從0.5 mg to 100 mg抗體中制備與純化 Fc 及(Fab')2。(Fab')2可流經純化柱獲得，而被柱子吸附的Fc也可zui后從柱子中洗脫得到，從而得到分離的 Fc 及(Fab')2片段。(Fab')2片段還可通過添加2-MEA (2巰基乙醇) 進一步解離為Fab片段。

 五、Anti-FabRICATOR抗體

來源于山羊的用于檢測FabRICATOR 酶的Anti-FabRICATOR多克隆抗體，可用于FabRICATOR酶的Western blot與 ELISA 檢測。

相關參考文獻：

Deglycosylation of mAb by EndoS for Improived Molecular Imaging：Peng Gao, Kenneth L. Pinkston, Nathaniel Wilganowski, Holly Robinson, Ali Azhdarinia, Banghe Zhu, Eva M. Sevick-Muraca, Barrett R. Harvey

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FabRICATOR (IdeS protease) - Lyophilized

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