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genebridges A001說明書

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PGK-GB2-NEO

€299.00 *

 

描述

 

設(shè)計(jì)PGK-gb2-neo模板以允許在原核和真核細(xì)胞中選擇新霉素/卡那霉素。

PGK-gb2-neo模板編碼新霉素/卡那霉素抗性基因,該基因結(jié)合了原核啟動(dòng)子(gb2)在大腸桿菌中表達(dá)卡那霉素抗性用真核啟動(dòng)子(PGK)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)新霉素抗性。原核啟動(dòng)子gb2是Em7啟動(dòng)子的略微修飾形式。它比通常使用的Tn5啟動(dòng)子介導(dǎo)更高的轉(zhuǎn)錄效率。小鼠磷酸葡萄糖激酶基因(PGK)的啟動(dòng)子用作真核啟動(dòng)子。合成的多腺苷酸化信號(hào)終止卡那霉素/新霉素表達(dá)。使用提供的PCR模板,可以容易地產(chǎn)生側(cè)翼為任何限制性位點(diǎn)的PGK-gb2-neo盒,以將盒克隆到所選擇的載體中。可以通過在PCR引物中添加相應(yīng)的序列來引入限制性位點(diǎn)。模板可以容易地用于產(chǎn)生由單個(gè)Red / ET重組步驟介導(dǎo)的靶向構(gòu)建體。

PGK-gb2-neo模板不是線性的,而是基于質(zhì)粒的(大小為3,377bp)。由于其R6K起源,它不能在大多數(shù)大腸桿菌菌株中復(fù)制。因此PCR產(chǎn)物可以直接用于下游應(yīng)用而無需任何進(jìn)一步純化。使用每個(gè)反應(yīng)1μl作為模板,可以進(jìn)行至少20次PCR反應(yīng)。

內(nèi)容

  • PCR模板(50 ng /μl,20μl)

  • 手冊

序列

PGK-GB2-NEO

啟動(dòng)子 neo R   終止子 

GCGGCCGCATT CTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCAT GCGCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCTCGC ACACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCT TCGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCT CGCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAG ATGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAAT AGCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGG GGGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGA GGCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTT CCTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGG CATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATC GGCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGG CTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGT TCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGG TGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACG GGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGC TGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGC CGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCG GCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTC GGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCT CGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGAT CTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCC GCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGA CATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGAC CGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCT ATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCG ACCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTA TTTTCATGATCTGTGTGTTGGTTTTTTTTTGCGGCGCG CTCGAG


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