HTI 凝血因子Xa

haemtech Coagulation Factor Xa

因子Xa在凝血酶原
酶中的參與說明了絲氨酸蛋白酶因子Xa在凝血酶原酶復合物中的參與。膜結合因子Xa與膜結合因子Va結合以形成凝血酶原酶復合物。該復合物通過蛋白水解除去凝血酶原的片段1.2（F1.2）部分，有效地將酶原凝血酶原（II）轉化為活性絲氨酸蛋白酶凝血酶（IIa）。

HCXA-0060

HCBXA-0061 

HCXA-GD Human gla-Domainless Factor Xa

HCXA-EGR

HCXA-DEGR 

HCXA-BEGR

BCXA-1060

BCXA-EGR 

 BCXA-DEGR

MCXA-5060 鼠標因子Xa

通過內在或外在因子Xase復合物激活酶原因子X產生活性絲氨酸蛋白酶因子Xa（1,2）。因子X的活化需要重鏈的蛋白水解切割，導致活化糖肽的釋放。因子Xa中的重鏈區含有絲氨酸蛋白酶催化結構域，而如酶原中的輕鏈含有膜結合結構域。

因子Xa參與凝血酶原酶復合物，其催化凝血酶原快速轉化為凝血酶。凝血酶原酶是由在血漿存在下組裝在細胞表面上的因子Xa（酶）和因子Va（輔因子）組成的酶復合物。盡管因子Xa可以獨立地催化凝血酶原的活化，但是在*組裝凝血酶原酶復合物的情況下，該反應發生的速率增加了近300,000倍。在解體凝血酶原酶復合物后，通過輔因子的失活，因子Va或通過抑制劑如ATIII直接抑制因子Xa來終止因子Xa在體內的凝固活性。

近年來，分子生物學家利用因子Xa對細菌中表達的融合蛋白進行位點特異性切割（9-12）。將Xa因子敏感位點摻入目標重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質之間。通過用因子Xa切割，從表達的雜交種中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去因子Xa。

因子Xa通過用從羅素的毒蛇毒液中分離的因子X活化劑活化純化的因子X來制備。通過在苯甲脒 - 瓊脂糖上的色譜法從活化混合物中純化因子Xa，然后進行凝膠過濾（1,3）。還可獲得幾種因子Xa的修飾形式，包括：A）含有三肽氯甲基酮抑制劑EGRck或熒光抑制劑Dansyl-EGRck的活性位點阻斷因子Xa; 和B）人Gla-domainlessβ-因子Xa。該酶以50％（體積/體積）甘油/ H2O供應，應儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析測定純度，并在因子Xa凝固測定和/或顯色底物測定中測量活性。

除了其在凝血研究中的廣泛應用之外，因子Xa還可用于融合蛋白的位點特異性切割。將因子Xa敏感位點摻入目的重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質之間。通過用因子Xa切割，從表達的雜交種中釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去因子Xa。批次一致性確保每次都可重現的結果。對于涉及細胞培養的實驗，請與我們聯系，討論用于細胞培養的定制低內毒素批次。

參考

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