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現貨genovis FabRICATOR®酶說明書

更新時間:2022-12-27      點擊次數:2018



現貨genovis FabRICATOR®酶說明書

FabRICATOR®酶

FabRICATOR酶以凍干粉形式提供,不添加防腐劑,2000和5000個單位小瓶可用于消化高達2-5 mg IgG。

FabRICATOR(IdeS)是一種半胱氨酸蛋白酶,它在鉸鏈下方的特定位置消化抗體,孵育30分鐘后產生F(ab’)2和Fc/2片段的同質池。

 

詳細信息

FabRICATOR(IdeS)是一種酶,它在鉸鏈區下方的特定位置消化IgG,產生F(ab’)2和Fc/2片段的同質池。除IgG外,沒有其他已知的底物。IgG在30分鐘內被消化,如果培養時間延長,則不會有過度消化的風險。由于FabRICATOR在生理反應條件下消化IgG,免疫反應性得以保留。最佳活性在37°C下獲得,但消化也可以在室溫下使用延長的反應時間進行。

FabRICATOR消化人類的所有亞類,以及猴子、兔子和綿羊的某些IgG。它對小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-為了消化這些抗體種類,我們建議使用FabRICATOR Z。

使用FabRICATOR消化IgG,然后還原,產生三個25kDa大小的片段(Fd'、Fc和LC),可使用LC-MS儀器輕松分析。高精度的質量分布能夠檢測抗體微變異,如糖基化、C-末端賴氨酸剪切、氧化和脫酰胺等。

FabRICATOR是從化膿性鏈球菌中克隆出來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為37725Da。FabRICATOR是一種重組修飾形式的IdeS,由Genovis AB開發,用于要求最高標準和一致性的生物技術應用。

儲存和穩定性

將FabRICATOR酶冷凍干燥并通過加水進行重組。重組后,FabRICATOR在+4-8°C下穩定1個月。產品在環境溫度下運輸,到達時應儲存在-20°C。

緩沖區

以下緩沖液已在不同pH下測試與FabRICATOR消化的兼容性。注意,FabRICATTOR酶在pH 5.0以下不可逆失活。pH 8.0以上的消化需要延長/優化的條件。

磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)6.0–8.0

Tris緩沖區7.0–8.0

MES緩沖區5.5–6.5

HEPES緩沖液7.0–8.0

碳酸氫銨緩沖液6.0–7.0

乙酸鈉緩沖液6.0

單位定義

在37°C下,在10mM磷酸鈉、137mM NaCl、2.7mM KCl pH 7.4中孵育30分鐘時,一個單位消化≥95%的1µg人IgG。

 


Genovis A0-FR1-050

 

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