rndsystems Cultrex 低生長因子基底膜提取物說明書

更新時間：2021-11-05 點擊次數：3173

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Cultrex 低生長因子基底膜提取物

Cultrex 低生長因子基底膜提取物，2 型，Pathclear

對于穩健的類器官培養 - 低生長因子基底膜提取物

目錄＃
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Cultrex 低生長因子基底膜提取物，2 型，Pathclear 摘要

Cultrex 低生長因子基底膜提取物 (RGF BME)，2 型特別有資格支持穩健類器官培養的建立和擴展。它的成分模擬體內微環境，以提高類器官的攝取率和生長。

主要優勢

• 有資格用于類器官細胞培養
• 常用的穩健和成熟的類器官系統
• 減少生長因子配方提供更明確的培養系統
• 質量控制以確保性能一致性

為什么使用 Cultrex RGF BME，類型 2？

Cultrex 低生長因子基底膜提取物 (RGF BME)，2 型是從 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤中純化的基底膜的可溶性形式。這種提取物提供了一種天然細胞外基質水凝膠，可在 37°C 下聚合形成重建的基底膜。基底膜是連續的特殊細胞外基質片，形成內皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經元細胞與其相鄰基質之間的界面，并通過影響細胞粘附、遷移、增殖和分化在組織組織中發揮重要作用。BME 的主要成分包括層粘連蛋白、IV 型膠原蛋白、內聯蛋白和硫酸乙酰肝素蛋白聚糖。

Cultrex RGF BME, Type 2 提供了一種專有配方，具有高拉伸強度，專為穩健的組織類器官培養以及需要細胞外基質支架的其他應用而設計。

使用 Cultrex RGF BME，2 型進行類器官細胞培養的方案。

Cultrex RGF BME，2 型非常適合用作類器官和 3D 細胞培養的支架。下面列出的是我們的研發團隊為類器官培養設計的方案，其中包含 Cultrex RGF BME、2 型以及來自 Bio-Techne 的生長因子、培養基補充劑和小分子。

規格

來源

鼠 Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) 腫瘤

蛋白質濃度

8-12 mg/mL 由 Lowry 測定確定

內毒素水平

≤ 8 EU/mL 鱟變形細胞裂解物 (LAL) 測定

無菌測試

按照 USP<71>無菌指南進行測試。

測試細胞培養

類器官培養- Cultrex RGF BME，2 型支持小鼠小腸類器官祖細胞的生長和擴增。

凝膠測定- Cultrex RGF BME，2 型在 37 °C 下在不到 30 分鐘內凝膠，并在培養基中在 37 °C 下保持凝膠形式至少 14 天。

圓頂檢測Cultrex RGF BME，2 型在細胞培養板上形成并保持穩定的 3-D 圓頂結構。

管形成分析- Cultrex RGF BME，2 型支持人（HBMVEC；HUVEC）或小鼠（SVEC4-10）內皮細胞形成毛細血管樣結構。

病毒檢測

總共 31 種生物體和病毒的 PCR 檢測結果為陰性，包括：支原體、17 種通常包含在小鼠抗體生產 (MAP) 檢測中的細菌和病毒株，以及 13 種額外的鼠傳染性病原體，包括 LDEV。

穩定

產品在 ≤ -70 °C 下儲存時，自生產之日起至少兩年內是穩定的。有關有效期，請參閱批次特定的分析證書。

運輸條件

產品隨附干冰或等效物。收到后，立即將其存放在產品標簽上建議的溫度下。

貯存

將未開封的產品儲存在 -70 °C。使用手動除霜冷凍機，避免重復凍融循環。

物種

鼠

限制

僅供研究使用。不用于診斷用途。

數據示例

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使用 2 型 Cultrex RGF BME 培養的人類腸道類器官。使用分別從橫結腸和回腸活檢組織中分離的細胞培養人類橫結腸類器官(A、B)和人類回腸類器官(C、D)。類器官作為支架基質嵌入 Cultrex RGF BME，2 型。A) 人體橫向類器官的明場圖像。B) 使用山羊抗人/小鼠 E-鈣粘蛋白抗原親和純化的多克隆抗體（綠色；目錄編號AF748）、MUC2 抗體（紅色；目錄編號NBP2-44431）和 DAPI（藍色）染色的人橫向類器官。C）人類回腸類器官的明場圖像。D) 使用醛縮酶 B 抗體（紅色；目錄號NBP2-15345）、人鈣粘蛋白-17 抗體（綠色；目錄號MAB1032和 DAPI（藍色）染色的人回腸類器官。

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在 2 型 Cultrex RGF BME 中形成 HepG2 球體。通過將 HepG2 肝肝癌細胞（每孔 10,000 個細胞）鋪在涂有 5 mg/mL Cultrex RGF BME 2 型的 24 孔板中形成肝細胞球體。在通過明場顯微鏡成像前培養 21 天。

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在 2 型 Cultrex RGF BME 中培養的小鼠腸道類器官。在 2 型 Cultrex RGF BME 中培養的小鼠腸道類器官被浸沒固定并處理以進行整體染色或石蠟包埋和切片以進行免疫細胞化學。A)使用山羊抗人/小鼠 E-鈣粘蛋白抗原親和純化的多克隆抗體（綠色；目錄編號AF748）在室溫下以 10 µg/mL染色整個小鼠腸道類器官3 小時。細胞用 DAPI（藍色）復染。B)石蠟包埋的小鼠腸道組織，針對人鈣粘蛋白-17 抗體（綠色；目錄號MAB1032）、人 Ki67/MKI67 抗體（紅色；目錄號AF7617）進行染色），并用 DAPI（藍色）復染。

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Cultrex RGF BME 中肝臟類器官的形成和分化，2 型。人肝臟類器官來源于人活檢組織。未分化的類器官是通過將分離的組織嵌入 Cultrex RGF BME 2 型并在專門培養基中培養而形成的。使用含有重組人 FGF-19（貨號 # 969-FG）、DAPT（貨號 # 2634）和地塞米松（貨號 # 1126）的培養基區分類器官。A)未分化的肝臟類器官。B)肝臟類器官在分化時會縮小。C）分化的肝臟類器官表達肝細胞標志物、白蛋白和 HNF3 β 以及 E-鈣粘蛋白的代表性圖像。

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人肺類器官培養在Cultrex BME RGF，類型2 A）人肺類器官的代表性圖像明使用Cultrex BME RGF，類型2中培養B）的Sox2（綠色的表達;目錄號AF2018）和乙酰化微管蛋白（紅色; Novus公司生物制品，目錄號NB600-567）。C) p63/TP73L（綠色；目錄# AF1916）和細胞角蛋白10（紅色；Novus Biologicals，目錄# NBP2-61736）的表達。D)Podoplanin（綠色；目錄號AF3670）作為 1 型肺泡細胞標志物的表達。