jetPRIME ^®

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描述

轉染效率

jetPRIME ^®是一種適用于日常實驗的強大轉染試劑。它導致各種來源的轉染貼壁細胞系以及原代細胞的比例異常高。

 與競爭對手的試劑相比，使用 jetPRIME ^®試劑獲得了 70% 至 90% 的轉染效率（圖 1 和圖 2）。

圖 1：jetPRIME 與其主要競爭對手的轉染效率比較。在 24 孔板中轉染后 24 小時，通過 FACS 分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對 Lipofectamine ^® 2000 和 jetPRIME ^®的推薦使用條件。

圖 2：jetPRIME ^®與 Lipofectamine ^® 3000 的轉染效率比較。在 96 孔板或 24 孔板中轉染后 24 小時，通過 FACS 分析在各種細胞系中評估轉染效率。根據制造商對 lipofectamine ^® 3000 和 jetPRIME ^®的推薦使用條件。

成本效益：更少的 DNA 和更少的試劑

jetPRIME ^® 是一種強大的體外轉染試劑，需要少量試劑和質粒 DNA，因此使用起來非常經濟高效 （表 1）。

表 1：推薦使用條件。根據制造商的建議，用于轉染的 6 孔板中每孔 DNA 和試劑（jetPRIME ^®和競爭對手）的數量。

除了降低成本之外，使用更少的 DNA 還可以最大限度地減少轉染引發的不利細胞毒性作用。因此，jetPRIME ^® 是實現高轉染效率和出色細胞活力的試劑。

更好的細胞活力

jetPRIME ^® 在轉染過程中對細胞極其溫和，從而提高細胞活力并改善轉染結果。用 jetPRIME ^®轉染的細胞 是健康的，而競爭者則觀察到主要的細胞毒性（圖 3）。

圖 3：轉染后 24 小時的細胞活力。根據制造商對每種試劑的建議，在轉染后 24 小時對 HeLa 細胞進行相差顯微鏡檢查。

易于使用的協議

jetPRIME ^® 是一種易于使用的轉染試劑（圖 4）：

• 快速且輕松地擴大和縮小規模
• 與血清和抗生素兼容

圖 4：jetPRIME ^®協議。方便的 DNA、siRNA 和 DNA 和 siRNA 共轉染方案。

在我們的博客部分查看我們的 專家提示，以加快 DNA 轉染。

應用

質粒轉染

jetPRIME ^®導致各種來源的轉染貼壁細胞系以及原代細胞的比例非常高（表 1）。

表 1：使用 jetPRIME ^®的各種細胞類型的轉染效率。轉染后 24 小時通過 FACS 分析確定 GFP 陽性細胞的百分比。

質粒是在細菌中常見的環狀 DNA 小分子。質粒與染色體 DNA 分開存在和復制，并且在細菌中它們通常攜帶有利于細菌生存的基因。質粒可被有意引入所需細胞并用于在特定細胞系中過表達感興趣的基因。此過程稱為 DNA 轉染，是研究基因功能或目標蛋白質的常用方法。

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基因組編輯

CRISPR/Cas9 系統在哺乳動物細胞中的使用最近成為一種在特定位點修改細胞基因組的非常方便的方法。它涉及將 (a) 一個或多個編碼 Cas9、特定 gRNA 和最終插入序列的質粒瞬時轉染到哺乳動物細胞中，或 (b) 一個或兩個質粒和一個 RNA 分子（gRNA）的混合物.

可用應用說明： 使用 jetPRIME ^{® 進行}CRISPR/Cas9 介導的基因破壞。

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siRNA轉染

jetPRIME ^® 導致多種細胞系中內源基因表達的抑制率超過 90%。例如，jetPRIME ^®介導的HeLa 細胞轉染與10 nM siRNA 雙鏈體靶向HeLa 細胞中的內源性核纖層蛋白A/C 顯著降低了核纖層蛋白A/C 基因的表達水平（圖1）。

圖 1：使用 jetPRIME ^{® 的}內源性 lamin A/C 靜音。用 10 nM 的 21-mer 核纖層蛋白 A/C siRNA 轉染 HeLa 細胞。48 小時后，使用抗 lamin A/C 抗體通過免疫熒光顯微鏡評估 lamin A/C 沉默。

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不同核酸的共轉染

jetPRIME ^® 非常適用于 DNA 和 siRNA/miRNA共轉染實驗或多種 DNA 質粒的共遞送。

我們使用 jetPRIME ^®進行了 DNA 和 siRNA 遞送，并在各種細胞系中觀察到高效的基因沉默且毒性極低。使用 10 nM siRNA 在貼壁細胞中實現了超過 90% 的沉默（圖 2）。

圖 2：使用 jetPRIME ^{® 共}轉染 DNA 和 siRNA 后，幾種細胞系中的外源熒光素酶沉默。在 6 孔板中，每孔使用 400 ng p4CMV-Luc 和 10 nM 熒光素酶 siRNA 進行實驗。

質量

每批 jetPRIME ^®試劑都通過用表達 GFP 的質粒對 HeLa 細胞進行 DNA 轉染進行內部測試，并且每瓶試劑都提供分析證書。