當前位置：首頁 > 技術文章 > bellbrooklabs新品上市

bellbrooklabs新品上市

更新時間：2020-12-10 點擊次數：3178

bellbrooklabs新品上市

Transcreener®cGAMP cGAS分析

使用均質的，與HTS兼容的Transcreener cGAS分析方法靶向cGAS-STING途徑

利用Transcreener cGAMP cGAS分析法發現cGAS抑制劑

Transcreener cGAMP cGAS分析法直接測量由環狀GMP-AMP合酶（cGAS，C6orf150、2'3'-cGAMP合酶）產生的環狀GMP-AMP （cGAMP）。通過測量cGAMP的產量，研究人員可以有效地確定 cGAS酶的活性。該測定法提供了一個*的工具，可以篩選整個化合物庫中的cGAS調節劑，以幫助找到針對cGAS-STING途徑的新療法。

cGAS是STING途徑中的重要信使

真核細胞胞質溶膠中DNA的存在是感染或細胞損傷的指示，并且在I型干擾素（IFN）誘導的驅動下引發強烈的免疫反應。cGAS是細胞質中雙鏈DNA的非常靈敏的傳感器。DNA的結合激活了該酶，從而產生了*的環狀二核苷酸第二信使cGAMP，它充當STING（干擾素基因刺激劑）受體的激動劑，從而導致I型干擾素應答。

cGAS STING途徑

直接檢測cGAMP以測量cGAS酶活性

Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息

cGAS分析示意圖FP

cGAS分析示意圖TR-FRET

Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET分析技術手冊（PDF）

應用領域

測量cGAS的酶活性
篩選cGAS抑制劑的復合文庫
量化抑制劑效力
確定抑制劑-cGAS停留時間

特征

直接檢測未標記的cGAMP
易于使用，同質，一步式
初始速度條件下的穩健分析Z'> 0.7
遠紅色熒光讀數一定程度地減少了化合物干擾
一種安全的非放射性方法
可用于FP或TR-FRET讀數

易于使用，混合閱讀，HTS就緒分析

Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用，混合閱讀的格式。運行您的酶反應，添加 Transcreener試劑，然后閱讀板。該測定與96、384和1536孔格式兼容。

在cGAS初始速度下檢測cGAMP

當使用標準曲線將原始數據轉換為cGAMP時，該測定法顯示線性。cGAS被雙鏈DNA激活，并需要ATP和GTP底物來生產cGAMP。

全長人cGAS滴定

cGAS酶滴定

線性響應

抑制劑篩選和執行SAR

Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式篩選化合物庫。還可以使用該測定法進行隨訪SAR，從而輕松確定抑制劑的效價。

1600復合先導篩

獲取準確的劑量響應測量

cGAS抑制劑劑量反應曲線

說明了cGAS酶的DNA和底物依賴性

該測定法準確地證明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情況下，雙鏈DNA激活了產生cGAMP的酶。一個45個堿基對的ISD（干擾素刺激性DNA）和一個60個堿基對的HSV（單純皰疹病毒）DNA均可激活該酶。該測定法對cGAMP具有很高的親和力，即使存在其他核苷酸也可以檢測。

dsDNA激活cGAS酶

cGAS DNA滴定

對ATP和GTP的依賴

依賴于ATP和GTP的cGAS酶

出色的信號穩定性

該測定顯示24小時以上的信號穩定性。這樣的印版穩定性對于大型的高通量篩選至關重要，由于大量樣品需要大量時間才能完成。

標準曲線包括ATP，GTP，dsDNA和cGAMP的滴定。在每個時間點讀取相同的板。

cGAS分析信號穩定性

cGAS分析服務

有興趣推進您的程序，但不想內部進行分析嗎？我們的科學家可以提供幫助！BellBrook的科學家將利用其豐富的生物化學和酶學專業知識與您合作，并加快您的cGAS計劃。

分析開發服務

潛在客戶發現服務包括：

抑制劑篩選–識別或確認靶標的活性。
抑制劑效能分析–靶標和/或相關蛋白的劑量反應。快速IC 50結果。
停留時間測量–使用“跳躍稀釋”酶法測定k off。
作用機理研究–動力學分析以定義抑制方式。

Component	Notes
cGAMP Antibody	Antibody specific to the dinucleotide cGAMP.
Tracer	When displaced, changes in fluorescence can be read in an FP or TR-FRET depending on the assay format.
Stop & Detect Buffer B, 10X	A buffer that can be used to stop enzyme reactions for an endpoint readout.
ATP	ATP can be used for the enzyme reaction and standard curve.
GTP	GTP can be used for the enzyme reaction and standard curve.
cGAMP	cGAMP can be used to create a standard curve.
Interferon Stimulatory DNA	ISD is a 45-bp oligomer used to activate the cGAS enzyme.

What You Will Need

Component	Notes
cGAS Enzyme	You can purchase active cGAS enzyme directly through BellBrook Labs.
Enzyme Buffer	We routinely use enzyme buffer containing 20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35, and 1% DMSO (test compound solvent). Use the buffer that is a best fit for your enzyme conditions
Assay Plates	You can purchase assay plates directly through BellBrook Labs. FP - An entirely black plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates, Cat. #4514. TR-FRET - An entirely white plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates Cat. #4513

Component

Notes

cGAS Enzyme

You can purchase active cGAS enzyme directly through BellBrook Labs.

Enzyme Buffer

We routinely use enzyme buffer containing 20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35, and 1% DMSO (test compound solvent). Use the buffer that is a best fit for your enzyme conditions

Assay Plates

You can purchase assay plates directly through BellBrook Labs.

FP - An entirely black plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates, Cat. #4514.

TR-FRET - An entirely white plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates Cat. #4513

Transcreener cGAMP cGAS Assay Kits

Cat. No.	Product Description	Price
3024-1K	Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well)	$798.00
3024-10K	Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well)	$4,615.00
3024-100K	Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)	$23,075.00
3025-1K	Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well)	$875.00
3025-10K	Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10,000 Assay, 384 Well)	$4,989.00
3025-100K	Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)	$24,950.00

cGAS Enzyme Ordering Information

* For custom or bulk orders (over 100 μg) please contact us (info@bellbrooklabs.com) for a quote.

Edit
Cat. No.	Product Description	Price
2227	Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 µg	$399.00
2228	Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 100 µg	$1,398.00

Learn More About Active Human cGAS Enzyme

cGAS Screening Bundles

* Includes enough enzyme for respective wells when used at 1.75 μg/mL (30 nM)

Cat. No.	Product Description	Price
3024-1K-B	Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 µg Human cGAS Enzyme	$1,275.00
3024-10K-B	Includes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 µg Human cGAS Enzyme	$6,670.00
3025-1K-B	Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K Kit and 20 µg Human cGAS Enzyme	$1,345.00
3025-10K-B	Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 µg Human cGAS Enzyme	$6,995.00

Assay Plates for FP

Cat. No.	Product Description	Price
2233	Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays)	$40.00
2229	Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays)	$45.00
2230	Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays)	$400.00

Assay Plates for TR-FRET

Cat. No.	Product Description	Price
2234	Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays)	$40.00
2231	Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays)	$50.00
2232	Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays)	$450.00